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高致病性豬藍耳病病毒試劑盒使用步驟

產品型號:

廠商性質:生產廠家

訪問量:1323

更新時間:2022-09-27

簡要描述:

合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,每kbp大體可設定30秒~1分鐘;當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時會得不到擴增產物;Anne

詳細說明:

高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)中含有聚合酶鏈式反應所需要各種試劑組分,如:引物、dNTPs、緩沖液、Taq酶等,PCR反應液混合液中加入檢測樣品,即可進行PCR擴增反應。PCR擴增產物經瓊脂糖電泳染色判斷,陽性樣本將在相應大小的片段處出現(xiàn)特異性條帶。

規(guī)格: 50T/100T

分類:pcr-熒光試劑盒

儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。

運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)產品特點:

◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;

◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;

◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;

◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

需要注意什么:

PCR反應液請在冰中配制,然后置于PCR反應儀上進行PCR反應。這種冷啟動法(Cool Start Method)與熱啟動法(Hot Start Method)相結合,更能有效地減少PCR過程中的非特異性反應,增強PCR擴增的特異性,能得到良好的PCR結果。

PCR的反應條件:

因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。

◇ 循環(huán)次數

根據模板DNA的量以及擴增片段的大小,設定25~30個循環(huán)。

如果循環(huán)次數太少,擴增量不足;如果循環(huán)次數太多,則會出現(xiàn)Smear。

◇ Anneal以及Extension

合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,每kbp大體可設定30秒~1分鐘;當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時會得不到擴增產物;Anneal溫度太低時,容易發(fā)生非特異性反應。另外,Extension時間太短時,會得不到擴增產物或者會有一些短的非特異性產物優(yōu)成;而Extension時間太長時,會出現(xiàn)Smear。





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